
Orbitrap Fusion LC-MS系統
賽默飛色譜質譜首席技術官Ian Jardine 博士說,“我們的使命是要創造有史以來最高性能的商業質譜儀。此外,我們想使這種有力的工具廣泛應用到科學界,使它非常容易使用。Orbitrap Fusion LC-MS實現了在一個靈活的研究質譜系統中融合了四極桿、線性離子阱和Orbitrap技術,最終產生了一種全新的質譜儀器類別,而這款儀器將改變我們客戶的科學研究。”
“我們最大的挑戰靈敏度和通量”,哈佛醫學院細胞生物學教授史Steven Gygi博士解釋說。“Orbitrap Fusion LC-MS是革命性的,它使我們能夠實現更大的蛋白質組全覆蓋,而且比以往定量更準確。”
Orbitrap Fusion LC-MS系統解決通量挑戰的方法之一是通過串聯質譜標記(TMT)。這項技術使質譜儀同時可以確定多個樣品中蛋白質的相對量。相比以前的儀器,Orbitrap Fusion LC-MS大大提高了數據的深度和質量,使TMT結果遠好于先前。新平臺利用的三級質譜(MS3)的選擇性,提高定量的準確性。賽默飛還推出新的TMT試劑,可以實現全面,同時分析多達10個樣品。
Orbitrap Fusion LC-MS的核心是一種三個不同質量分析器結構,它們一起工作可以提高分析性能提高到新的水平,并使全新的實驗方法成為可能:
(1)四極桿作為預選擇,隔離寬度為0.4amu,達到極好的靈敏度和選擇性;
(2)超高場軌道阱提供超過45??0000的分辨率,以及高達15赫茲的掃描速率,提供無與倫比的選擇性和分析速度;
(3)多級離子通絡隨后跟隨雙壓線性離子阱,其提供MSn HCD、CID和ETD的碎裂,并進行快速(掃描率高達20赫茲),靈敏的質譜分析與。同步的前級選擇提高了儀器的信噪比。
這“Tribrid”結構使用戶能夠確定大量更低豐度蛋白,速度比可能獲得的現有商業化儀器更快。它獨特的架構實現在Orbitrap和LIT中同時實現預隔離、碎裂和數據采集。與現有儀器相比,它可以收集更多高質量的數據,可能擴展實驗范圍。
在MSn分析中的任何階段都可以選擇碎片模式,通過 Orbitrap或LIT進行檢測,使得從代謝產物、多聚糖、翻譯后修飾和序列多態性中獲得新水平的結構信息。
在典型的代謝組學實驗中,隨著目標化合物的變化,科學家們經常遇到的未知物。為了確定未知物,必須將樣品上LC-LIT上重新分析以獲得MSn數據。但在第二次分析,它很難確保保留時間吻合,因此引入很大的不確定性。然而,憑借其獨特三種質量分析器結構,新的Orbitrap Fusion LC-MS解決了這個問題,用戶能將許多小分析實驗轉換,并最終確定未知物。
Orbitrap Fusion LC-MS軟件可提供動態掃描管理(DSM)的功能,當實驗運行時,其可自動調整掃描參數,以達到最佳的效果。
Orbitrap Fusion LC-MS還提供一種新型的,易于使用的拖放方法編輯器,其可以從設置的復雜方法中去除大部分的猜測。這是只一套全面支持該系統大的軟件平臺功能的一部分。它還包括:
(1)Freestyle軟件,一種新的數據可視化工具,也有利于快速的方法開發和數據質量評估。
(2)Proteome Discoverer,一個全面的應用軟件,用于蛋白質鑒定。
(3)Compound Discoverer軟件,廣泛的應用于小分子結構鑒定。
(4)SIEVE軟件,用于蛋白質組學和小分子樣品的定量分析。
(5)mzCloud軟件,一種新型的質譜數據庫,支持未知數鑒定和結構鑒定。