據(jù)福建檢驗(yàn)檢疫局相關(guān)專家介紹，轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系是國(guó)家農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)允許進(jìn)口的，進(jìn)口時(shí)必須開展符合性驗(yàn)證檢測(cè)的一種品系。國(guó)內(nèi)外還未見轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測(cè)引物及方法的報(bào)道。此次福建檢驗(yàn)檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)方法，首次設(shè)計(jì)、篩選到了轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測(cè)引物，并建立普遍適用于基層實(shí)驗(yàn)室的轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系LAMP檢測(cè)方法。
該方法具有高效、簡(jiǎn)便、高特異性等優(yōu)勢(shì)。一是高效。LAMP方法只需要恒溫就能完成擴(kuò)增反應(yīng)，沒有PCR反應(yīng)中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復(fù)性過程，因此可將PCR法的2-3小時(shí)的擴(kuò)增時(shí)間縮短至約1小時(shí)，即能擴(kuò)增出109～1010倍靶序列拷貝，DNA產(chǎn)量高達(dá)500ug/mL，且能檢測(cè)到的拷貝數(shù)低至PCR檢測(cè)限的1/10。二是簡(jiǎn)便。因LAMP的恒溫?cái)U(kuò)增和產(chǎn)物直觀檢測(cè)的特點(diǎn)使其只需要一個(gè)簡(jiǎn)單的恒溫器，無需昂貴的檢測(cè)設(shè)備，有利于對(duì)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)或基層實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。三是高特異性。采用六個(gè)區(qū)段、六條引物對(duì)靶DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增，決定了LAMP法的特異性高于只用1對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增的PCR法。
據(jù)悉，目前檢測(cè)轉(zhuǎn)基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時(shí)長(zhǎng)，操作繁瑣，靈敏度不夠，容易產(chǎn)交叉污染，質(zhì)控復(fù)雜，假陽性、假陰性比例偏高。實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法靈敏度高，但成本昂貴，技術(shù)要求高，且必須使用大型儀器設(shè)備。
此次福建運(yùn)用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法，在轉(zhuǎn)基因特異品系檢測(cè)領(lǐng)域有效建立了普遍適用于檢驗(yàn)檢疫一線基層實(shí)驗(yàn)室的快速、簡(jiǎn)便、高效的轉(zhuǎn)基因品系檢測(cè)方法，檢測(cè)成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。
