太原市疾病預防控制中心的PCR核酸檢測實驗室設置在中心4樓。在進入實驗室前,工作人員需先在更衣室穿上防護衣,戴上口罩、帽子和手套。經過嚴格的防護消毒流程后,記者跟隨工作人員進入實驗室的“玻璃屋”。實驗室分為四個獨立的區域,分別是:試劑準備區、標本制作區、擴增區和產物分析區。在試劑準備區,記者看到,工作人員根據不同試劑的屬性,將檢測試劑盒分別冷藏在2-8攝氏度以及零下20攝氏度的專用冰柜中。通常情況下,檢測試劑在這個區域內“整裝待發”,并“組裝完成”。在這個區域配制成功后的試劑,將被通過特殊傳送窗口,進入到隔壁的“標本制作區”。
標本制作區是整個實驗室的核心部位,通常情況下,工作人員要在這里將流感病毒的核酸提取出來。核酸是病毒基因,核酸提取在H7N9禽流感病毒的檢測中是最關鍵一步。工作人員高麗介紹:在平日的檢測過程中,檢測員會在離心瓶中放入檢測試劑,經過震蕩、離心等一系列復雜的程序,病毒的核酸便被分離出來。最后,樣本被加入到外形像個小型洗衣機的“熒光定量PCR儀器”中。在擴增區,隨著儀器的運轉,病毒基因被擴增到了幾百萬個不等,經過3-5個小時后,檢測結果將會顯示在電腦屏幕上,檢測人員就可以根據曲線圖判斷是否為H7N9病毒。
值得一提的是,為了保證環境清潔,實驗室使用單向通道,“只能前進,不能倒退”。當記者提出想返回先前的區域時,工作人員表示,必須先從出口門出去,再從入口重新進來。記者看到,每個實驗區域都設置了單獨的洗手臺和清潔池。工作人員每進入下一級區域,將被要求換上不同顏色的防護服。根據防護級別不同,防護衣分為粉色、綠色和藍色。“檢測H7N9病毒,從試劑準備到出結果,一般需要8個小時左右?!备啕悈⑴c了前3例的疑似病例排查。她說,為減少實驗過程中的污染,保證結果精準,整個檢測過程中,實驗人員被要求全程呆在實驗室。H7N9禽流感病毒檢測需要重復檢測兩次,如果結果相同,再送到省疾控中心實驗室檢測一次,如果結果呈陽性,將被送到中國疾控中心實驗室復核。
負壓隔離病房:帶菌空氣特殊處理后排放
作為我省首批唯一一所人感染H7N9禽流感的省市兩級定點救治醫院,太原市第四人民醫院的重癥醫學科已按照相關要求:備好32張救治病床,并做好了一切救治準備。4月15日,本報記者被特許進入該院的負壓隔離病房進行探訪。
重癥醫學科被分為清潔區、潛在污染區、緩沖間和隔離病房等區域。在進入隔離病房之前,記者被要求不能隨意進出,因為隨著開關門次數的增多,病房內的壓力會即時發生改變,進而影響到室內空氣質量。在負壓病房外,醫院專門設立了緩沖間,“醫務人員在緩沖間要換好N95口罩、穿戴好鞋帽、護目鏡、白色連體防護衣后才進入。”重癥醫學科護士長張霞說。
負壓病房是世衛組織在規定搶救SARS病人時特別強調的一個重要條件,只有設置負壓病房的醫院,才可以救治有嚴重呼吸系統傳染病的病人。
這里一間負壓隔離病房面積約為18平方米。按照救治重癥病人的標準,醫院已在房間內配備了有創呼吸機、無創呼吸機、輸液泵、注射泵、吸氧裝置等裝置,“確保重癥病人一來,醫護人員馬上投入搶救?!贬t院相關負責人介紹:“負壓病房”意味著病房的壓力最低。在病房開門的瞬間,新鮮空氣會被“壓”進病房,而病房內的空氣卻不會“溜出去”。這既保證了給病人輸送新鮮的空氣,又能防止病房內的污染氣體向外倒流。記者發現,隔離病房的送風口在病床的上方,出風口在病床一側的墻壁下方。張霞介紹,之所以這樣設計,是為了讓病人躺在病床上時,“頭部送來新風,而呼出的氣體通過負壓,從側面的管道里抽送出去,經過特殊處理后排放?!?/FONT>
除了大量的搶救設備以及負壓設計外,記者在隔離病房內發現了一個1平方米大小的傳遞窗。張霞介紹:病人救治期間,食物、藥品等物品會通過傳遞窗消毒后送入病床前,這樣可以避免醫護人員由于傳送物品而頻繁進出病房所帶來的污染。病房兩側的走廊是雙通道設計:工作人員和醫務人員一個通道,病人走另外一個通道。病房床頭的方桌上,擺放著手部消毒液。張霞說,在對病人進行救治的過程中,醫護人員被要求隨時用消毒液對手部進行消毒。
隔離病房內設置有單獨的衛生間。據介紹,衛生間的局部壓力要比病房低一些,“因為那里有病人的分泌物和排泄物,壓力低的目的在于:避免污濁的空氣和病菌外流?!庇浾咴谛l生間看到,醫院專為病人配備了單獨的洗漱池和便池,方便病人使用。
檢測相關程序 讓病毒現出原形
步驟一:提取樣本
一旦發現可疑病例,遍布全省各市的哨點醫院將提取患者的鼻咽拭子或是呼吸道樣本,送往省內15家具有試劑及確診能力的網絡實驗室。
步驟二:標本處理
送達的標本將首先拿到生物安全柜內進行處理,防止標本被外環境污染和實驗人員被感染。
工作人員將粘有咽部上皮細胞的棉簽充分擠壓,這樣細胞才能釋放出來融入液體內。
步驟三:提取核酸
融入細胞的的液體將由工作人員送到一臺名為“核酸提取工作站”的儀器內提取病毒的核酸(DNA)。
儀器采取磁珠法提取,經過裂解處理,磁珠吸附核酸,再將磁珠上的核酸洗出,完成核酸從細胞中提取。
步驟四:確定病毒
核酸提取后,對病毒進行PCR檢測。此前,將進行PCR體系配置:向樣本中添加反應劑,讓病毒“現身”。針對H7N9病毒檢測,國家下發的有9種反應劑。如有病毒成分,起反應時將被儀器感知。
體系配置完畢后,與已提取出的核酸融合,通過熒光定量機檢測,確定是否為流感,確定是哪類流感。